医生需要通过暗视野显微镜检查、梅毒血清学试验、脑脊液检查、梅毒疹组织病理学检查等，来确诊本病。暗视野显微镜检查医生会取患者的可疑皮损组织（如硬下疳、扁平湿疣、湿丘疹等），在暗视野显微镜下检查，查找是否有梅毒螺旋体，为梅毒的确诊依据。梅毒血清学试验包括非梅毒螺旋体血清学试验、梅毒螺旋体血清学试验等，可用于诊断及判定治疗效果。脑脊液检查主要用于诊断梅毒导致的神经损害，尤其是对无症状性神经梅毒的诊断、治疗和预后判断有重要意义。主要包括常规检查、性病研究实验室玻片试验及荧光螺旋体抗体吸附试验。梅毒疹组织病理学检查对梅毒螺旋体感染的组织进行病理学检查，有助于医生协助诊断。